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浙江省科技型企業---加速您的多肽研究
首頁 >多肽服務 >多肽修飾介紹

多肽服務

多肽修飾介紹
  • 修飾概述

    1. N端或側鏈氨基的修飾
      乙?;?(Acetylation)
      甲?;?(Formylation)
      生物素標記 (Biotin)
      脂肪酸修飾 (Palm, Myr,Lauryl)
      三氟乙?;?(TFA)
      苯甲?;?(Bzo)
      2-氨基苯甲?;?(Abz)
      Maleimide
      氯乙?;?、溴乙?;?/span>
      Suc修飾
      Hynic
      DOTA、NOTA (Chelating Peptides)
    2. C端修飾
      酰胺化 (Amidation)
      酯化 (Esterification)
      AMC
      AFC 
      pNA
      CMK
      FMK
      醛基化(-CHO)
      醇基化(-ol)
      AOMK
    3. 多肽磷酸化標記
      p-Tyr
      p-Ser
      p-Thr
    4. D型氨基酸
      常見氨基酸:D-Ala、D-Cys、D-Asp、D-Glu、D-Phe、D-His、D-Ile、D-Lys、D-Leu、D-Met、D-Asn、D-Pro、D-Gln、D-Arg、D-Ser、D-Thr、D-Trp、D-Tyr
      非常見氨基酸:D-Nle、D-Nal、D-Nva、D-Orn、D-Tic、D-Pen、D-Abu、D-Bal、D-Cha、D-Cit、D-Hyp、
    5. 甲基化及其它烷基化修飾
      N-甲基化修飾:
      NMe-His、NMe-Met、NMe-Gly、NMe-Ala、NMe-Asn、NMe-Asp、NMe-Arg、NMe-Cys、NMe-Glu、NMe-Gln、NMe-Leu、NMe-Ile、NMe-Lys、NMe-Ser、NMe-Thr、NMe-Trp、NMe-Val、NMe-Nle、NMe-Phe
      其他位點甲基化修飾:Lys(Me)、Lys(Me)2、Lys(Me)3、Arg(Me)、Arg(Me)2S、Arg(Me)2AS、Cys(Me)、Asp(OMe)、Glu(OMe)、Tyr(Me)、Trp(Me)
      同一條序列的多個氨基酸N-烷基化(Peptoid)
      其它的烷基化修飾服務:N-乙基、N-苯丙基、N-烯丙基、Tyr(Et)、Trp(For)、Ser側鏈烷基化
    6. 同位素標記|多種氨基酸 (D型以及L型)的13C,15N,D以及18O的同位素標記
    7. 單熒光修飾
      N端、Lys或Cys巰基:
      FAM、FITC、TAMRA、Bodipy、Cy3、Cy5、Cy5。5、Cy7
      N端或Lys側鏈:
      DansylChlorde、Mca、Dabcyl、Dnp、CarboxyRhodamine110、7OHCCA、Tide Fluor 系列、Alexa Fluor 系列、Texas Red、QSY系列、Atto 系列
      Cys巰基:DACIA、Farnesyl
      Glu、Asp側鏈或者C端:Edans
    8. 雙熒光修飾 (FRET peptide)
      Dabcyl+Edans
      Mca+Dnp
      FITC+5FAM
      5FAM+TQ2
      Cy5+QSY21
      6FAM+QSY9
      5TAMRA+QSY7
      DNP+DACIA
      5FAM+Farnesyl
      Tide Fluor 555+Tide Fluor 647
      Tide Fluor 488+Tide Flour550
    9. 其它側鏈修飾
      Tyr衍生物:Tyr(3-Cl)、Tyr(3-NO2)、Tyr(SO3H2)
      Phe衍生物:Phe(4-Cl)、Phe(4-NO2)、Phe(3-Cl)、Phe(4-CF3)
      Ser側鏈烷基化:Ser(Butanoyl)、Ser(Octanoyl)、Ser(Palm)、Ser(Laury)、Ser(Myr)
    10. PEG (聚乙二醇)修飾
      PEG2、PEG4、PEG8、PEG12、PEG24、PEG36
      PEG2000、PEG5000、PEG3400
      PEG20K、PEG40K
    11. 多肽蛋白偶聯
      KLH (Keyhole Limpet Hemocyanin)
      BSA (Bovine Serum Albumin)
      OVA (Ovalbumin)
    12. 環肽合成
      訂書肽(stapled and stiched peptide)
      首尾成環
      側鏈成環(內酯、內酰胺、醚鍵等)
      多重二硫鍵及二硒鍵(Sec&Sec)

      click chemistry(通過肽分子內疊氮-炔基的Husigen反應合成環肽)

      單硫醚環化
      Cyclization via xylene or mesitylene
    13. 糖肽
      alpha-, beta-Glc and beta-N-acetylgalactosamine (GalNAc)
      Glucose: Ser(beta-D-GlcNAc), Thr(beta-D-GlcNAc, Asn(beta-D-GlcNAc), etc.
      Galactose: Ser(alpha-D-GalNAc) and Thr(alpha-D-GalNAc) (Tn Antigens)
      Ser(Gal-beta(1-3)GalNAc) and Thr (Gal-beta(1-3)GalNAc) (TF Antigens)
      Mannose: Ser(alpha-D-ManNAc), Thr(alpha-D-ManNAc, Ser(alpha-D-Man), Thr(alpha-D-Man)

  • C端或側鏈羧基修飾

    杭州專肽生物可將各種含有氨基或羥基的小分子化合物或藥物分子,通過化學手段,與多肽的C端羧基,形成酰胺鍵或酯鍵,以合成種類繁多的多肽衍生物。以下展示部分常見的C端修飾種類。

     

    C端修飾種類 修飾簡寫 修飾結構

    酰胺化

    (Amidation)

    -NH2  C端酰胺化(專肽生物www.cnjhd.com)

    甲氨基化

    (Methylation)

    -NHMe

    乙胺基化

    (Ethamidation)

    -NHEt

    己氨基化

    (Hexamidation)

    -NH(CH2)6

    醇基化

    (Alcoholylation)

    -OL

    甲酯化

    (Methylation)

    -OMe

    乙酯化

    (Ethylation)

    -OEt

    芐酯化

    (Benzyl esterification)

    -OBzl

    醛基化

    (Aldolization)

    -CHO

    對硝基苯胺

    (P-nitroaniline)

    -pNA C端對硝基苯胺(專肽生物www.cnjhd.com)

    7-氨基-4-三氟甲基香豆素

    (7-amino-4-trifluoromethylcoumarin)

    -AFC 香豆素修飾(專肽生物www.cnjhd.com)

    7-氨基-4-甲基香豆素

    (7-amino-4-methylcoumarin)

    -AMC

    氯甲基酮

    (Chloromethyl ketone)

    -CMK

    氟甲基酮

    (Fluoromethyl ketone)

    -FMC

    2,6-二甲苯甲酰氧甲基酮

    (2,6-xylyloxymethyl ketone)

    -AOMK

    多巴胺

    (Dopamine)

    -DOPA 多巴胺修飾(專肽生物www.cnjhd.com)

    苯胺

    (Phenylamine)

    -NHPh 苯胺修飾(專肽生物www.cnjhd.com)

    成功案例(C端修飾或側鏈羧基修飾)

    1, 產品序列:H-Arg-His-Asp-Asn-Phe-Gln-Ala-Val-Gly-Gly-Gly-Gly-Trp-Leu-NHCH2CH3

    2, 產品結構:

    多肽C端修飾的結構(專肽生物www.cnjhd.com)

    3,產品HPLC圖譜

    多肽C端修飾的HPLC(專肽生物www.cnjhd.com)

    4,產品MS圖譜

    多肽C端修飾的MS(專肽生物www.cnjhd.com)

  • N端或側鏈氨基修飾

    修飾名稱 修飾簡寫 修飾結構

    生物素化

    (Biotinylation)

    Biotin- 多肽生物素修飾(專肽生物www.cnjhd.com)

    生物素-6氨基己酸

    (Biotin-Acp-)

    Biotin-Acp-

    2-疊氮乙酸

    (2-azidoacetic Acid)

    N3-Gly- 多肽疊氮修飾(專肽生物www.cnjhd.com)

    5-疊氮戊酸

    (5-Azivalic Acid)

    N3-Ava- 多肽疊氮修飾(專肽生物www.cnjhd.com)

    6-疊氮己酸

    (6-azidohexanoic Acid)

    N3-Acp- 多肽疊氮修飾(專肽生物www.cnjhd.com)

    3-馬來酰亞氨基丙酸

    (3-Maleimidopropionic Acid)

    MIPA-

    6-馬來酰亞胺基己酸

    (6-Maleimidocaproic Acid)

    Mal-

    丁酸

    (Butyric Acid)

    But-

    丁二酸/琥珀酸

    (Succinic Acid)

    Suc-

    異丁酸

    (Isobutyric Acid)

    Iba

    N-炔丙基甘氨酸

    (N-Propargylglycine)

    N-Propargylglycine-

    硫辛酸

    (Lipoic Acid)

    lipoic acid- 多肽硫辛酸修飾(專肽生物www.cnjhd.com)

     

     

    成功案例(側鏈氨基修飾)

    1、產品序列:H2N-WHSDMEWWYLLGK(AEEA-MIPA)-OH,MIPA: 3-馬來酰亞氨基丙酸,AEEA: NH2-PEG2-乙酸
    產品結構:

    多肽側鏈氨基修飾結構(專肽生物www.cnjhd.com)

    2、HPLC圖:

    多肽側鏈氨基修飾的HPLC(專肽生物www.cnjhd.com)

    3、MS圖:

    多肽側鏈氨基修飾的MS(專肽生物www.cnjhd.com)

  • 熒光分子標記

    多肽熒光標記由于沒有放射性,實驗操作簡單。因此,目前在生物學研究中多肽熒光標記應用非常廣泛,多肽熒光標記方法與熒光試劑的結構有關系,對于有游離羧基的采用的方法與接多肽反應相同,也采用HBTU/HOBt/DIEA方法連接。 在N端標記FITC的多肽需經歷環化作用來形成熒光素,通常會伴有最后一個氨基酸的去除,但當有一個間隔器如氨基己酸,或者是通過非酸性環境將目的多肽從樹脂上切下來時,這種情況可避免在切割的過程中被TFA切割掉。

    多肽熒光標記波長(專肽生物www.cnjhd.com)

    (紅色加粗的熒光基團,為常用基團)

    熒光標記分類 標記基團 入射波長 發射波長 標記位置 結構
    Alexa Fluor系列
    Alexa Fluor 350
    346 
    445
    肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈
     
    Alexa Fluor 405
    400
    424
    肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈
     
    Alexa Fluor 430
    430
    545
    肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈
     
    Alexa Fluor 488
    494
    517
    肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈
     
    Alexa Fluor 514
    517
    542
    肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈
     
    Alexa Fluor 532
    530
    555
    肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈
     
    Alexa Fluor 594
    590
    617
    肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈
     
    Alexa Fluor 647 650 668 肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈  
    Bodipy系列
    Bodipy 493/503
    500 506 肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈  
    Bodipy FL
    503 509 肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈  
    Bodipy R6G
    528 550 肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈  
    Bodipy 530/550
    534 554 肽鏈 N 端、Lys 側鏈  
    Bodipy TMR-X
    542 574 肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈  
    Bodipy 558/568
    558 569 肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈  
    Bodipy 576/589
    576 590 肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈  
    Bodipy 581/591
    584 592 肽鏈 N 端、Lys 側鏈  
    Bodipy TR
    589 617 肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈  
    Bodipy 630/650
    625 640 肽鏈 N 端、Lys 側鏈  
    Cy系列熒
    Cy-3 550 570 肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈  
    Cy-5 646 662 肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈  
    Cy-5.5 673 707 肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈  
    Cy-7 750 773 肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈  
    Fluorescein系列熒
    FITC 492 518 肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈  
    FAM 494 522 肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈  
    QSY系列
    QSY-7
    560 None 肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈  
    QSY-9
    562 None 肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈  
    QSY-21
    661 None 肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈  
    Rhodamine系列
    Texas Red
    595 615 肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈  
    RF488
    498 520 肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈  
    TAMRA
    565 580 肽鏈 N 端、Lys 側鏈和 Cys 側鏈  
    Rhodamine B
    555 580 肽鏈 N 端、Lys 側鏈  
    Rhodamine Red-X
    570 590 肽鏈 N 端、Lys 側鏈  
    其它熒光標記
    Dansyl
    333 518 肽鏈 N 端、Lys 側鏈  
    Dabcyl
    454
    None 肽鏈 N 端、Lys 側鏈  
    DNP
    350 None 肽鏈 N 端、Lys 側鏈  
    MCA
    358 410 肽鏈 N 端、Lys 側鏈  
    SBF
    385 and 515
    None Cys 側鏈  
    EDANS
    335 493
    Glu 或 Asp 側鏈
     
    7-OHCCA
    342(pH=4)
    447(pH=4)
    肽鏈 N 端和 Lys 側鏈
     
    Dacia
    376 465 Cys 側鏈  
    BHQ-1 480 580 肽鏈 N 端、Lys 側鏈  
    BHQ-2 560 670 肽鏈 N 端、Lys 側鏈  
    BHQ-3 620 730 肽鏈 N 端、Lys 側鏈  
    JOE 520 548 肽鏈 N 端、Lys 側鏈  

    成功案例(單熒光分子標記)

    BHQ標記多肽(專肽生物www.cnjhd.com)

    BHQ-1標記結構(專肽生物www.cnjhd.com)

    1、產品序列:BHQ-1-Arg-Lys-Cys-Pro-Leu-Met-Trp-Ser-Gly-Gly-OH

     

    2、產品結構:

    熒光標記產品(專肽生物www.cnjhd.com)

     

    3、產品HPLC報告:

    熒光標記HPLC(專肽生物www.cnjhd.com)

     

    4、產品紫外檢測報告:

    熒光標記報告(專肽生物www.cnjhd.com)

  • 雙熒光標記

    修飾簡寫 修飾結構
    Abz和pNA Abz和pNA雙標記(專肽生物www.cnjhd.com)
    DABCYL和EDANS DABCYL和EDANS雙標記(專肽生物www.cnjhd.com)
    Dansyl和EDANS Dansyl和EDANS雙標記(專肽生物www.cnjhd.com)
    Suc和AMC Suc和AMC雙標記(專肽生物www.cnjhd.com)

     

    成功案例(雙標記)

    1,產品序列:(Abz)-VAGL-pNA

    2,產品結構:

    雙標記多肽的結構(專肽生物www.cnjhd.com)

     

    3,產品HPLC報告:

    雙標記多肽的HPLC(專肽生物www.cnjhd.com)

     

    4,產品MS報告:

    雙標記多肽的MS(專肽生物www.cnjhd.com)

  • 多肽磷酸化標記

    1、磷酸化應用:磷酸肽在生命過程中發揮重要作用,磷酸化的位置在多肽上的Tyr、Ser,Thr,。目前磷酸肽合成一般都采用磷酸化氨基酸,目前使用的都是單芐基磷酸化氨基酸。磷酸化氨基酸的連接一般采用HBTU/HOBt/DIEA方法,但是目前采用該方法合成磷酸化多肽也有缺點,特別是在合成多磷酸化多肽或氨基酸較長的多肽的時候,連接效率低,最后產品純度很低,對于這種磷酸化多肽,我們考慮采用后磷酸化方法,其合成過程就是在多肽合成結束后,選擇性脫去要標記的氨基酸的側鏈保護基,對于Tyr,Thr可以直接使用側鏈不保護的氨基酸進行反應,而Ser可以采用Fmoc-Ser(trt),在1% TFA/DCM條件下可以定量的脫除。后磷酸化,采用雙芐基亞磷酰胺,四氮唑生成亞磷酰胺四唑活性中間體,連接到羥基上,隨后在過氧酸下氧化生成磷?;?,完成反應。

     

    2、磷酸化修飾分類

    2.1. L型磷酸化修飾  

            Thr(H2PO3)、 pT 、蘇氨酸磷酸化
            Tyr(H2PO3)、pY 、酪氨酸磷酸化
            Ser(H2PO3) 、pS、絲氨酸磷酸化

    2.2. D型磷酸化修飾

            D-Thr(H2PO3)、p(D-T)  、D型蘇氨酸磷酸化
            D-Tyr(H2PO3)、p(D-Y) 、D型酪氨酸磷酸化
            D-Ser(H2PO3) 、p(D-S)、D型絲氨酸磷酸化   

    2.3.  雙磷酸化修飾

              一個序列中有兩個Thr,Tyr,Ser 位點進行磷酸化修飾。

    2.4.   多磷酸化修飾

              一個序列中有多個Thr,Tyr,Ser 位點進行磷酸化修飾

     

    3、磷酸化位點結構

    修飾名稱 修飾簡寫 修飾結構
    磷酸化絲氨酸 pSer、Ser(H2PO3) 磷酸化絲氨酸(專肽生物www.cnjhd.com)
    磷酸化酪氨酸 pTyr、Tyr(H2PO3) 磷酸化酪氨酸(專肽生物www.cnjhd.com)
    磷酸化蘇氨酸 pThr、Thr(H2PO3) 磷酸化蘇氨酸(專肽生物www.cnjhd.com)

     

     

    4 、磷酸化的作用

    蛋白質磷酸化是生物界最普遍,也是最重要的一種蛋白質翻譯后修飾,20世紀50年代以來一直被生物學家看作是一種動態的生物調節過程。在細胞中,大概有1/3的的蛋白質被認為是通過磷酸化修飾的。蛋白質的磷酸化修飾與多種生物學過程密切相關,如DNA損傷修復、轉錄調節、信號傳導、細胞凋亡的調節等。磷酸化蛋白質及多肽的研究可以幫助人們闡述上述過程的機理,進一步認識生命活動的本質。近年來隨著蛋白質組技術的不斷發展,蛋白質磷酸化的研究越來越受到廣泛的關注。

     

    磷酸化的作用(專肽生物www.cnjhd.com)

    蛋白質磷酸化在細胞信號轉導中的作用

    磷酸化多肽主要指肽鏈中的Ser、Tyr和Thr殘基的側鏈羥基被修飾成酸式磷酸酯多肽。磷酸化多肽是研究蛋白質磷酸化過程的必不可少的工具,因此研究蛋白質及多肽的磷酸化反應并確定成熟簡便的合成路線就變得非常重要。目前為止,多肽的磷酸化修飾主要有后磷酸化法和單體法兩種合成方法。后磷酸化法是多肽序列在樹脂上合成完后,再對其中的Ser、Tyr或Thr的側鏈羥基進行磷酸化;單體法則是將適當保護的磷酸化氨基酸直接引入到多肽序列中,這種方法較后磷酸化法操作更為簡便,已經成為多肽磷酸化修飾的主要方法。單體法修飾時,磷酸化的氨基酸由于側鏈修飾的較大基團產生的位阻而導致難以與肽鏈縮合,并且之后的氨基酸引入都會比較困難,尤其在含有多個磷酸化位點修飾時,合成將變得異常困難,并且最終產物成分復雜,難以分離,產率極低。因此,當肽鏈中多個位點進行磷酸化時,可以考慮采用后磷酸化法,其合成過程主要就是在多肽合成結束之后,選擇性的脫去要標記氨基酸的側鏈保護基,對于Tyr,Thr可以直接使用側鏈不保護的氨基酸進行反應。側鏈保護基在1% TFA/DCM條件下可以定量的脫除。后磷酸化時,可以采用雙芐基亞磷酰胺,四氮唑生成亞磷酰胺四唑活性中間體,連接到羥基上,然后在過氧酸條件下氧化生成磷?;?,完成反應。

    蛋白質磷酸化在細胞信號轉導中的作用(專肽生物www.cnjhd.com)

    成功案例(磷酸化多肽)

    1、多肽序列:TDHGAEIVYK (pSer)PVVSGDT(pSer)P RHL –CONH2

     

    2、多肽結構:

    磷酸化多肽合成結構(專肽生物www.cnjhd.com)

    3、HPLC圖譜:

    磷酸化多肽合成的HPLC(專肽生物www.cnjhd.com)

    磷酸化多肽合成的MS(專肽生物www.cnjhd.com)

  • D型氨基酸

    與自然界中普遍存在的20種L型氨基酸相比,19種D型氨基酸(Gly沒有手性)往往在多肽活性和穩定性中有著特殊作用,因此常被做為最基本的序列改造工具。

    D型氨基酸可用于酶的結構-功能分析方面的研究;用于合成多肽藥物,如多肽抗生素(阿撲西林ASPOXICILLIN),腸胃藥(OXTREOTIDE),利尿藥,腹瀉藥(善得定SANDOSTATIN ACETATE),酶抑制劑,促皮質素類似物,止痛鎮痛藥,減肥藥,Ⅱ型糖尿病治療藥(那格列奈NATEGLINIDE)等。

    在專肽生物的多肽合成服務中,我們專門列了這樣一個19種D型氨基酸欄目,方便大家去選擇。

    {D-Ala} D-丙氨酸
    {D-Arg} D-精氨酸
    {D-Asp} D-天冬氨酸
    {D-Asn} D-谷氨酰胺
    {D-Cys} D-半胱氨酸
    {D-Glu} D-谷氨酸
    {D-Gln} D-谷氨酰胺
    {D-His} D-組氨酸
    {D-Allo-Ile} D-別異亮氨酸
    {D-Leu} D-亮氨酸
    {D-Lys} D-賴氨酸
    {D-Met} D-甲硫氨酸
    {D-Pro} D-脯氨酸
    {D-Phe} D-苯丙氨酸
    {D-Ser} D-絲氨酸
    {D-Tyr} D-酪氨酸
    {D-Thr} D-蘇氨酸
    {D-Trp} D-色氨酸
    {D-Val} D-纈氨酸

    注:Gly甘氨酸沒有手性, Ile對應的為D-別異亮氨酸。

    成功案例(D型氨基酸)

    1、產品序列:全D型nghqtpalqqgthssrqvtplslrsrsstfnk

    2、產品結構:

    3、產品HPLC報告:

    4、產品MS報告:

  • 甲基化描述

    甲基化修飾多肽也叫甲基化標記多肽,甲基化修飾是蛋白質翻譯后修飾(PTMs)的一種,幾乎參與細胞所有的生命活動過程,發揮著重要的調控作用,蛋白質在甲基轉移酶的催化下將甲基轉移至特定的氨基酸殘基上共價結合的過程。甲基化是一種可逆的修飾過程,由去甲基化酶催化去甲基化作用。研究發現,常見甲基化/去甲基化作用的氨基酸主要是賴氨酸(Lys)和精氨酸(Arg)研究表明,組蛋白賴氨酸甲基化修飾執行著多種生物學功能,如干細胞的維持和分化、X染色體失活、轉錄調節和DNA損傷反應等,主要是影響染色質濃縮,抑制基因表達。組蛋白精氨酸甲基化在基因轉錄調控中發揮著重要作用,并能影響細胞的多種生理過程,包括DNA修復、信號轉導、細胞發育及癌癥發生等因此國肽生物特地開發甲基化修飾多肽技術,為科學家在蛋白質翻譯后修飾(PTMS)的研究中提供幫助。

     

    根據多肽上甲基化氨基酸多肽修飾或標記的位置可以分為:

    1. N端甲基化修飾(20種L型氨基酸氨基上增加一個甲基)

    2. 側鏈甲基化修飾 (Arg精氨酸甲基化多肽、Lys賴氨酸甲基化多肽)

     

    根據甲基化修飾多肽的個數可以分為:

    1. Arg(me)精氨酸單甲基修飾多肽

    2. Arg(Me)2(Asymetrial)精氨酸非對稱二甲基修飾多肽

    3. Arg(Me)2(Symetrical)精氨酸對稱二甲基修飾多肽

    4. Lys(Me)賴氨酸單甲基修飾多肽

    5. Lys(Me)2賴氨酸二甲基修飾多肽

    6. Lys(Me)3賴氨酸三甲基修飾多肽

  • 烷基化描述

    修飾名稱 修飾簡寫 修飾結構
    己酸 Hex-
    辛酸 Oct-
    癸酸 Dec-
    十一烷酸 Undecyl-
    十二烷酸,月桂酸 Lau-
     十四烷酸,肉豆蔻酸 Myr-
    十六烷酸,棕櫚酸 Pal-
    十八烷酸, 硬脂酸 Ste-

  • 同位素標記描述

    專肽生物提供同位素標記服務,如果您想讓多肽分子量增加特定的道爾頓,我們可以根據多肽序列,為您選擇合適的同位素氨基酸。

    我們將同位素氨基酸大致分為以下幾類。

    1,D全標記

    2,13C,14N全標

    3,僅13C全標記

    4,α-13C單標記

    5,15N單標記,僅標記一

    應用:1,隨著對生長抑素(somatostatin,SST)及其類似物研究的日趨深入,利用放射性核素標記的ssT類似物與腫瘤細胞表面的生長抑素受體(somatostatin receptor,ssTR)特異性結合使腫瘤顯像,從而達到定位、定性診斷的目的,已成為當今核醫學領域研究的主要內容之一。

  • 螯合物前體多肽

    放射性金屬元素,例如: Cu、 Ga、 Lu、等可以通過與富含氨基或羧基配體的螯合作用引入多肽分子,在正電子發射計算機斷層顯像(PET)技術中發揮重要的作用,被廣泛地應用于腫瘤的診斷研究。

    專肽生物可對所生產的多肽標記與放射性金屬螯合的配體,滿足客戶相應的研究需求(注:專肽生物不提供螯合放射性金屬元素的服務)。以下是一些常見的、客戶所選擇的螯合配體:

     

    配體簡寫 配體名稱 結構
    DOTA 1,4,7,10-四氮雜環十二烷-1,4,7,10-四乙酸
    NOTA 1,4,7-三氮雜環壬烷-N,N',N''-三乙酸
    DTPA 二乙烯三胺五醋酸

  • PEG修飾簡介

    聚乙二醇(PEG),也稱為聚環氧乙烷(PEO),是可溶于水和大多數有機溶劑的兩親性聚醚。PEG及其衍生物是可用于由美國FDA認證的生物藥物產品的少數聚合物之一。

    PEG修飾是指將PEG聚合物鏈共價連接到靶分子,通常是小分子化學藥物或大生物分子如肽,蛋白質,碳水化合物,脂質,寡核苷酸,親和配體,輔因子,脂質體和其他生物材料。而作為藥物先導化合物的多肽分子在體內的應用受到一定程度的限制,主要體現在生物體腎小球的過濾作用、體內蛋白酶的水解破壞作用以及因多肽分子引起的體內抗原反應。將多肽用PEG修飾后(Pegylation),上述三方面的限制均大幅減小,從而提高了多肽在生物體內的應用。

    專肽生物可對所合成的多肽進行各種不同類型的PEG修飾,以滿足客戶的不同需求。主要修飾位點在多肽的N端、C端,Lys側鏈和Cys的巰基。修飾所用PEG單分子分子量區間在PEG2~PEG24之間;PEG大分子分子量區間在PEG500~PEG40K之間。

     

    PEG分類 修飾簡寫 細節說明 修飾位置 PEG結構
    小分子PEG PEG2、mini-PEG、AEEA 右側可選乙酸或羧基兩種形式 肽鏈N端、C端、Lys側鏈、肽中間等
    PEG3、mini-PEG3、AEEEA 右側可選乙酸或羧基兩種形式 肽鏈N端、C端、Lys側鏈、肽中間等
    PEG4 右側可選乙酸或羧基兩種形式 肽鏈N端、C端、Lys側鏈、肽中間等
    PEG6   右側可選乙酸或羧基兩種形式 肽鏈N端、C端、Lys側鏈、肽中間等
    高分子PEG mPEG-NH2 500、550、750、1000、2000、5000等 肽鏈C端,或Asp側鏈
    NH2-PEG-NH2 1000 、2000 、3400 、5000、10000、20000、40000等 肽鏈C端,或Asp側鏈
    NH2-PEG-COOH 1000 、2000 、3400 、5000、10000、20000、40000等 肽鏈C端,或Asp側鏈
    NH2-PEG-Galactose 2000、3400、5000等 肽鏈C端,或Asp側鏈
    mPEG-COOH 500、550、750、1000、2000、5000等 N端修飾
    HO-PEG-COOH 2000、5000等 N端修飾
    COOH-PEG-COOH 550、750、1000、2000等 N端修飾

  • 引入含有疊氮、烯基、炔基的化合物,運用Click方法

    點擊化學(Click chemistry),又稱為“鏈接化學”或“動態組合化學,其主旨是通過小單元的拼接,來快速可靠地完成各種分子的化學合成。點擊化學的代表反應為銅催化的疊氮-炔基Husigen環加成反應。點擊化學在多肽化學中的應用主要體現為一條肽鏈中的炔基和另一條肽鏈中的疊氮基通脫1,3-偶極環加成反應形成三氮唑五元環結構。此結構能穩固多肽與蛋白質的空間結構,快速偶聯兩條肽鏈,同時使肽鏈的二級結構(α-螺旋和β-折疊)發生改變來改變其生物活性。點擊化學的反應條件比較接近人體的生理環境,反應時間短,可以防止蛋白質的變性。

    Click Chemistry由于其溫和的條件和高的選擇性,已被廣泛用于制藥和生物技術行業的生物共軛,生物標記和材料科學。 Click化學工具具有廣泛的功能基團:疊氮化物,炔烴,DBCO,TCO,四嗪,BCN ...

    專肽生物提供將多種Click結構添加到多肽結構中,以滿足廣大科研人員的實驗要求。

    分類 說明 修飾結構 原料名稱 簡寫 修飾位置

    引入疊氮

    疊氮化物試劑使Click Chemistry成為可能,并可用于與含胺的生物分子反應,修飾羧酸基團等。 疊氮修飾(專肽生物www.cnjhd.com) 2-疊氮乙酸 N3-Gly- 肽鏈N端、Lys側鏈
    疊氮修飾(專肽生物www.cnjhd.com)  5-疊氮戊酸 N3-Ava- 肽鏈N端、Lys側鏈
    疊氮修飾(專肽生物www.cnjhd.com)  6-疊氮己酸 N3-Acp- 肽鏈N端、Lys側鏈
    疊氮修飾(專肽生物www.cnjhd.com) Lys(N3) -Lys(N3)-、-K(N3)- 類似于氨基酸,任意位置
    引入烯基 烯基化物試劑使Click Chemistry成為可能,并可用于與含胺的生物分子反應,修飾羧酸基團等。 烯基修飾(專肽生物www.cnjhd.com) 2-甲基丙烯酸 Methacryl- 肽鏈N端、Lys側鏈
    烯基修飾(專肽生物www.cnjhd.com) 4-戊烯酸 pentenoic acid- 肽鏈N端、Lys側鏈
    烯基修飾(專肽生物www.cnjhd.com)  5-己烯酸 5-heptenoic acid- 肽鏈N端、Lys側鏈
    引入炔基 炔烴試劑可通過銅催化的疊氮化物-炔烴Click化學與含疊氮化物的化合物或生物分子反應,以產生穩定的三唑鍵。 烯基修飾(專肽生物www.cnjhd.com)  N-炔丙基甘氨酸 N-Propargylglycine- 肽鏈N端、C端、Lys側鏈、肽的中間等
    炔基修飾(專肽生物www.cnjhd.com)   4-戊炔酸 Pentinoyl- 肽鏈N端、Lys側鏈
    炔基修飾(專肽生物www.cnjhd.com) 5-己炔酸 5-Hexynoic acid- 肽鏈N端、Lys側鏈

    Bicyclo[6.1.0]nonyne

    BCN試劑

    BCN試劑(雙環[6.1.0] nonyne)可以通過無銅的Click Chemistry與疊氮化物標記的分子或生物分子反應。 炔基修飾(專肽生物www.cnjhd.com) BCN試劑 BCN \

    Dibenzocyclooctyne

    二苯并環辛炔

    DBCO(二苯并環辛炔)試劑是用于應變促進的炔疊氮化物環加成(SPAAC)的最具反應性的環炔烴之一,可實現無銅點擊化學。 炔基修飾(專肽生物www.cnjhd.com) 二苯并環辛炔 DBCO \

    Trans-Cyclooctene Reagents

    反式環辛烯試劑

    TCO試劑(反式環辛烯試劑)可用于通過無銅Click Chemical標記抗體,蛋白質和其他大分子。 炔基修飾(專肽生物www.cnjhd.com) 反式環辛烯試劑 TCO \

    Tetrazine reagents

    Tetrazine試劑

    Tetrazine試劑可用于許多應用,例如抗體標記和蛋白質修飾。發現川嗪以反式-環辛烯(TCO)作為親二烯體進行生物正交反應的動力學最快。與甲基四嗪相比,四嗪的化學穩定性較低。 炔基修飾(專肽生物www.cnjhd.com) Tetrazine試劑 Tetrazine \

     

     

     

     

     

     

     

     

    成功案例(引入疊氮、烯、炔、Click運用)

    1、產品序列:Propargyl-PEG6-KKK-NH2

    2、產品結構:

    疊氮炔基烯基的結構(專肽生物www.cnjhd.com)

    3、產品HPLC圖譜

    疊氮炔基烯基的HPLC(專肽生物www.cnjhd.com)

    4、產品MS圖譜

    疊氮炔基烯基的MS(專肽生物www.cnjhd.com)

  • 生物素標記

    生物素-親合素系統 (biotin-avidin system,BAS),是70年代后期應用于免疫學,并得到迅速發展的一種新型生物反應放大系統。由于它具有生物素與親合素之間高度親和力及多級放大效應,并與熒光素、酶、同位素等免疫標記技術有機地結合,使各種示蹤免疫分析的特異性和靈敏度進一步提高。主要有用于標記多肽氨基的生物素N-羥基丁二酰亞胺酯(BNHS)和生物素對硝基酚酯(pBNP),其中以BNHS最常用,當然,也可以直接使用生物素也可以標記,因為其結構上有個游離的羧基,采用HBTU/HOBt/DIEA方法縮合,由于生物素的溶解度低,使用DMSO/DMF的混合溶劑增加溶解度。

    此外生物素是復合維生素B2的組成部分。它與雞清蛋白、親和素、真菌蛋白、鏈霉親和素均有較高親和性和結合力。親和素和 鏈霉親和素都是四聚體蛋白,可緊緊地結合四分子D-biotin,其結合力是已知自然界中最強的非共價作用。生物素與親和素之間的相互作用可用于蛋白純化、檢測、固化、藥物導向和蛋白質結構分析等方面。多肽生物素標記常在肽的N端或Lys側鏈;肽鏈 C端也可用Biotin標記,此時肽鏈C端需引入Lys或者乙二胺結構。

    生物素標記位置 結構展示
    多肽N端 生物素標記多肽(專肽生物www.cnjhd.com)
    Lys側鏈 生物素標記多肽(專肽生物www.cnjhd.com)
    多肽C端 生物素標記多肽(專肽生物www.cnjhd.com)

     

    成功案例(生物素標記)

    1、產品序列:H-Gly-LysAla-Gly-Gly-Lys-Ala-Lys-Asp-Ser-Gly-Lys-Ala-Thr-Lys(Biotin)-OH

    2、產品結構:

    多肽生物素標記的結構(專肽生物www.cnjhd.com)

    3、HPLC圖譜

    多肽生物素標記的HPLC(專肽生物www.cnjhd.com)

     

    4、MS圖譜

    多肽生物素標記的MS(專肽生物www.cnjhd.com)

  • 環肽(酰胺、二硫、硫酯、硫醚、酯鍵、脲基、硫脲)

    專肽生物提供各種環狀多肽的定制合成服務。

    成環修飾分類 成環修飾名稱 成環修飾結構展示
    酰胺成環 首尾酰胺鍵成環 酰胺鍵環狀多肽(專肽生物www.cnjhd.com)
    C端與中間Lys或Orn酰胺成環 酰胺鍵環狀多肽(專肽生物www.cnjhd.com)
    N端與中間Asp或Glu酰胺成環 酰胺鍵環狀多肽(專肽生物www.cnjhd.com)
    中間酰胺成環 酰胺鍵環狀多肽(專肽生物www.cnjhd.com)
    二硫鍵成環 分子內一對二硫鍵 酰胺鍵環狀多肽(專肽生物www.cnjhd.com)
    分子內兩對二硫鍵 酰胺鍵環狀多肽(專肽生物www.cnjhd.com)
    分子內三對二硫鍵 酰胺鍵環狀多肽(專肽生物www.cnjhd.com)
    分子間一對二硫鍵 酰胺鍵環狀多肽(專肽生物www.cnjhd.com)
    分子間兩對二硫鍵 酰胺鍵環狀多肽(專肽生物www.cnjhd.com)
    酯鍵成環 普通酯鍵成環 酰胺鍵環狀多肽(專肽生物www.cnjhd.com)
    硫酯鍵成環 酰胺鍵環狀多肽(專肽生物www.cnjhd.com)
    醚鍵成環 普通醚鍵成環 酰胺鍵環狀多肽(專肽生物www.cnjhd.com)
    硫醚鍵成環 酰胺鍵環狀多肽(專肽生物www.cnjhd.com)
    脲基成環 普通脲基成環 酰胺鍵環狀多肽(專肽生物www.cnjhd.com)
    硫脲成環 酰胺鍵環狀多肽(專肽生物www.cnjhd.com)
    CLIPS環 1-CLIPS 酰胺鍵環狀多肽(專肽生物www.cnjhd.com)
    2-CLIPS 酰胺鍵環狀多肽(專肽生物www.cnjhd.com)
    3-CLIPS 酰胺鍵環狀多肽(專肽生物www.cnjhd.com)

     

    成功案例(多肽成環修飾)

    1、產品結構:

    多肽成環結構(專肽生物www.cnjhd.com)

    2、HPLC圖

    多肽成環的HPLC(專肽生物www.cnjhd.com)

    3、MS圖

    多肽成環的MS(專肽生物www.cnjhd.com)

  • 引入各種特殊氨基酸

    為滿足科研人員對多肽的各種要求,杭州專肽生物可以將一些特殊氨基酸插入到多肽序列中,前面已有各種D型、甲基化氨基酸和同位素標記氨基酸,此處展示其它特殊氨基酸。

    特殊氨基酸的名稱 氨基酸簡寫 結構展示
    硒代半胱氨酸 Sec 硒代半胱氨酸(專肽生物www.cnjhd.com)
    側鏈乙?;嚢彼?/span> Lyc(Ac) Lys(Ac)(專肽生物www.cnjhd.com)
    鳥氨酸 Orn 鳥氨酸Orn(專肽生物www.cnjhd.com)
    2,4-二氨基丁酸 Dab 2,4-二氨基丁酸(專肽生物www.cnjhd.com)
    2,3-二氨基丙酸 Dap 2,3-二氨基丙酸(專肽生物www.cnjhd.com)
    正亮氨酸 Nle 正亮氨酸(專肽生物www.cnjhd.com)
    4-氨基丁酸 GABA GABA(專肽生物www.cnjhd.com)
    α-氨基辛二酸 Asu Asu(專肽生物www.cnjhd.com)
    苯甘氨酸 Phg Phg(專肽生物www.cnjhd.com)

    炔丙基甘氨酸

    Propargylglycine

    Pra 炔丙基甘氨酸(專肽生物www.cnjhd.com)
    D-炔丙基甘氨酸 D-Pra D型炔丙基甘氨酸(專肽生物www.cnjhd.com)

    羥脯氨酸

    L-Hydroxyproline

    Hyp 羥脯氨酸(專肽生物www.cnjhd.com)

    D-羥脯氨酸

    D-Hydroxyproline

    D-Hyp D型羥脯氨酸(專肽生物www.cnjhd.com)

    胍氨酸

    Citrullin

    Cit 瓜氨酸Cit(專肽生物www.cnjhd.com)

    D型胍氨酸

    D-Citrullin

    D-Cit D型胍氨酸Cit(專肽生物www.cnjhd.com)

     

  • MAPs多聚抗原肽

    多聚抗原肽(Multiple-Antigen peptide, MAP)是生產高效價的抗多肽抗體和多肽疫苗的一種有效方法。

    杭州專肽生物根據客戶需求,幫助客戶設計并且按要求定制合成各種MAP類產品,所合成的產物純度和收率均較高。

    多聚抗原肽分類 分類簡寫 結構展示
    二分支 MAPs-2 二分支多聚抗原肽(專肽生物www.cnjhd.com)
    四分支 MAPs-4 四分支多聚抗原肽(專肽生物www.cnjhd.com)
    八分支 MAPs-8 八分支多聚抗原肽(專肽生物www.cnjhd.com)

    部分多聚抗原肽的結構設計問題

    1,聚合度的設計,n=2-8都可以合成,n越大,合成難度也會越大。

    2,支鏈部分的肽序列,可以不一樣,常見于2分支肽的兩個支鏈肽段。

    3,序列中可以插入賴氨酸,通過賴氨酸側鏈引入熒光基團(常見的5-Fam、Fitc),以達到實驗檢測目的。  

    4,對于4分支肽或者8分支肽,空間位阻因素對合成的影響就體現出來了,通??梢栽谥ф滊亩魏唾嚢彼岬陌被g插入 6氨基己酸,增加肽段之間的空間距離。

    成功案例(分支肽)

    1、產品序列:{(GSVHIHIIHG)2-Lys}2-Lys-Lys(5-Fam)-OH 2四分支肽

    2、產品結構:

    多聚抗原肽,分支肽的結構(專肽生物www.cnjhd.com)

    3、產品HPLC圖譜

    多聚抗原肽,分支肽的HPLC(專肽生物www.cnjhd.com)

    4、產品MS圖譜

    多聚抗原肽,分支肽的MS(專肽生物www.cnjhd.com)

  • KLH、BSA、OVA載體蛋白偶聯服務

    多肽載體蛋白偶聯修飾用于制備抗多肽類抗體。單獨的多肽通常太小不足以激起充分的免疫反應,而帶有很多抗原表位的載體蛋白有利于刺激輔助性T細胞,進一步誘導B細胞免疫反應。將多肽用載體蛋白修飾后,其作為一個整體來激起免疫反應,所產生的抗體中有針對多肽的,有針對鏈接劑的,也有針對載體蛋白的。

    最常見的載體蛋白有3種:

    1)KLH (Keyhole Limpet Hemocyanin)即血藍蛋白,它是在某些軟體動物、節肢動物(蜘蛛和甲殼蟲)的血淋巴中發現的一種游離的藍色呼吸色素。血藍蛋白含兩個直接連接多肽鏈的銅離子,與含鐵的血紅蛋白類似,它易于氧結合,也易與氧解離,是已知的惟一可與氧可逆結合的銅蛋白,氧化時呈青綠色,還原時呈白色。由于KLH比BSA有更高的免疫原性,因而是最常被選用的載體蛋白。

    2)BSA (Bovine Serum Albumin),即牛血清白蛋白,它屬于最穩定的和可溶的白蛋白。它大約有30-35個主要氨基可用于與鏈接劑發生共軛反應, 使得BSA成為一種很流行的弱抗原化合物載體蛋白。BSA的不利之處在于在很多實驗中,它被當作封閉劑使用,如果多肽-BSA偶聯物的抗血清用于這樣的檢測分析中,通常會出現假陽性,因為這些血清含有抗BSA的抗體。

    3)OVA (Ovalbumin),即雞卵白蛋白。它可作為第二載體蛋白去驗證抗體是否特異性地只針對多肽而并非載體蛋白(如BSA)。

    多肽蛋白偶聯服務(專肽生物www.cnjhd.com)

  • R8S5訂書肽介紹

    一般來說,多肽大分子發揮其生物活性和藥理作用是通過其二級和三級結構來實現的。簡單的線性結構多肽由于其構象比較以穩定,在發揮生物活性作用方面受到比較大的限制。針對上述問題,多肽化學家設計了Stapled Peptides,其原理是通過碳碳雙鍵,將多肽中某一特定片段序列構象穩定下來,以滿足特定的研究需求。Stapled Peptides一般采用S5和R8,中間間隔3個氨基酸,通過烯烴復分解反應來形成碳碳雙鍵。專肽生物還可以開發其它類似的側鏈含烯烴結構的特殊氨基酸,來形成其它類似的衍生物。

    訂書肽的合成與普通多肽合成的區別在于在固相合成肽鏈過程中引入兩個含有α-甲基,α-烯基的非天然氨基酸,然后兩個非天然氨基酸之間發生烯烴復分解反應環化構成穩定α-螺旋結構構象的全碳支架,進而合成訂書肽。

    訂書肽,R8S5多肽(專肽生物www.cnjhd.com)